Bio-Rad_iCycleriQ熒光定量PCR儀作為一種常用的分子生物學(xué)工具,近年來在基因表達(dá)分析領(lǐng)域發(fā)揮了舉足輕重的作用。基因表達(dá)是生物體基因功能的重要體現(xiàn),通過研究基因表達(dá)水平的變化,科研人員能夠深入了解基因在生物體中的作用以及與疾病的相關(guān)性。
Bio-Rad_iCycleriQ熒光定量PCR儀正是滿足這一需求的有效工具。
熒光定量PCR技術(shù),是在傳統(tǒng)的PCR基礎(chǔ)上,通過加入熒光基團(tuán),實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增過程中的熒光信號(hào)強(qiáng)度,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因表達(dá)量的定量分析。該技術(shù)具有高度敏感、特異性和準(zhǔn)確性,已成為基因表達(dá)分析的金標(biāo)準(zhǔn)方法。
基因表達(dá)分析中的應(yīng)用
1.目標(biāo)基因表達(dá)量的絕對(duì)定量
可以對(duì)目標(biāo)基因的表達(dá)量進(jìn)行絕對(duì)定量,即計(jì)算出特定基因在樣本中的拷貝數(shù)。這對(duì)于研究基因功能、了解基因在生物體中的作用具有重要意義。例如,在疾病研究中,通過比較正常組織和病變組織中目標(biāo)基因的表達(dá)量,可以揭示基因與疾病之間的關(guān)系。
2.目標(biāo)基因表達(dá)量的相對(duì)定量
還可以對(duì)目標(biāo)基因的表達(dá)量進(jìn)行相對(duì)定量,即比較不同樣本中目標(biāo)基因的表達(dá)水平。這種方法通常采用內(nèi)參基因(housekeepinggene)作為參照,以消除不同樣本間RNA提取質(zhì)量、反轉(zhuǎn)錄效率等因素的影響。相對(duì)定量方法在諸如疾病診斷、藥物篩選等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
3.基因差異表達(dá)分析
可以用于檢測(cè)基因在不同條件下(如不同處理組、疾病與正常對(duì)照等)的差異表達(dá)。通過對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組進(jìn)行比較,可以篩選出差異表達(dá)基因,為后續(xù)的研究提供目標(biāo)基因。這種方法在功能基因組學(xué)、藥物研發(fā)等領(lǐng)域具有重要價(jià)值。